超滤离心管的分子量选择及使用前预处理方法介绍
点击次数：6157 更新时间：2021-04-13
超滤离心管常用于做细胞培养上清的蛋白浓缩的实验，它会有一个类似于内管和外管的两个部分，内管中是带有一定分子量的膜，当高速离心时，分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了，分子量比它大的就截留在上面（即内管中），这就是超滤的原理。
首先要为大家介绍的是超滤离心管的分子量选择：
按照样品量和目标分子量选择适当的离心超滤管，为了得到高收率，所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右，不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径，膜上的孔并非均匀，离心高压下也可能渗漏，因此截留孔径越小，流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大，可选择较小容积的离心超滤管多次重复加样离心。
如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质，可将待浓缩样品稀释到离心超滤管大容积再离心，重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心，虽然高品质的产品都有防死端设计，可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩，体积越小，越容易因表面吸附而损失得率。离心后轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，能提高回收率。尽量避免接触膜表面。
那么，在使用超滤离心管时需不需要进行预处理呢？
通常不需要预处理即可使用，不过对于蛋白质样本处理，特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL)，用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。对本产品表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失，大多数情况下，在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率，因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。
希望上述内容能够帮助大家更好的了解本产品的相关知识。
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