一、固相萃取仪核心原理与装置组成
固相萃取仪(SPE)通过固体吸附剂选择性吸附液体样品中的目标化合物，实现与基体及干扰物的分离，再经洗脱或解吸附富集目标物。其核心装置包括：
固相萃取柱：由医用聚丙烯柱管、多孔聚丙烯筛板(20μm)及填料(40-60μm或80-100μm)组成，常见规格如100mg/1ml、500mg/3ml等。
真空系统：包括真空泵、压力表、缓冲瓶，用于提供负压促进样品通过萃取柱。
收集装置：试管架(12/24位可调)、收集瓶，用于收集洗脱液。
辅助部件：大体积上样器、StopCock阀(精确控制流速)、防交叉污染装置。
二、操作前准备：细节决定成败
环境与安全
确保操作台稳固、无积水、无酸碱腐蚀，远离空调直吹(防止仪器老化)。
佩戴防护手套及护目镜，核查实验室稳压电源，检查废液收集瓶容量。
样品与试剂准备
样品处理：
液相样品：直接进样。
固态样品：溶解后过滤(0.45μm滤膜)、离心或稀释至合适浓度。
试剂选择：
萃取柱：根据目标物性质选择填料(如C18柱适用于非极性物质，NH2柱适用于酸性化合物)。
活化溶剂：反相柱用甲醇(6倍柱体积)→ 水(4倍柱体积)；正相柱用样品所在有机溶剂；离子交换柱用3-5ml去离子水。
设备检查
检查真空泵输出压力(<0.1MPa，负压>-0.09MPa)，确认各通道密封垫无异物。
独立控制通道需提前确认开启状态，避免压力异常。
三、操作步骤：标准化流程与关键参数
活化萃取柱
目的：去除杂质，创造适宜溶剂环境。
方法：依次用甲醇(6倍柱体积)、水(4倍柱体积)以0.5-1ml/min流速通过萃取柱，观察筛板表面呈水平光滑浸润面。
上样
方法：将样品溶液缓慢加入萃取柱，控制总上样量≤柱体积2000倍(如1ml柱体最多处理2L样品)。
流速：生物检材类≤5ml/min，工业废水类≤15ml/min，每通过300ml暂停检查液压表指针是否稳定在绿色区。
收集：目标化合物随样品基液流出时开始收集，杂质被保留在柱上。
淋洗(除杂)
目的：去除干扰物，保留目标物。
方法：用5ml含0.1%乙酸水溶液三次过柱，流速与上样阶段一致。
洗脱
目的：用小体积溶剂洗脱目标物。
方法：
单体系洗脱：75% 0.35mol/L甲醇 + 25%丙酮混合溶液，流速调低至初始阶段65%。
双体系洗脱：交替使用两种溶剂，记录各组接收管编号。
洗脱体积：避免过大(可通过减少溶剂用量或缩短时间控制)。
后处理
洗脱液处理：干燥(氮气吹干)、重溶(甲醇/水)或浓缩(旋转蒸发)。
柱再生：蒸馏水循环冲洗30分钟 → 60%甲醇维持45分钟，拆除后置于真空干燥器保存。
四、操作后维护：延长设备寿命
清洁与存放
清洁：用去离子水或清洗剂冲洗管路，直至无残留。
存放：防潮、防尘、避光，长期未使用需启用自动排液模式消除泵内存液，每月启动自检程序防止密封件粘连。
数据记录与关机
登记机时、机型码、样品pH参数至《使用登记本》。
关闭主电源总控断路器，核查关机指示灯状态。
五、常见问题与解决方案
萃取柱堵塞
原因：样品含颗粒物或填料松动。
解决：用甲醇反向冲洗(低流速)，若无效则更换萃取柱。
洗脱效果差
原因：洗脱溶剂选择不当或流速过快。
解决：优化洗脱条件(如增加甲醇比例)，降低流速至初始阶段65%。
压力异常
原因：密封垫漏气或通道未关闭。
解决：检查密封垫平整性，关闭无需使用的通道。
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