一、储存条件控制

1. 未使用 SPE 柱的储存
   • 保持密封状态，避免柱内填料受潮或被空气中的杂质污染。不同类型填料（如 C18、硅胶、离子交换树脂）需按说明书要求储存，例如硅胶基质柱需防潮，应存放在干燥器或密封袋中，相对湿度控制在 30%-60%。
   • 控制储存温度，多数 SPE 柱需在室温（15-30℃）下存放，避免极端高温（>40℃）或低温（<0℃），防止填料结构破坏（如化学键合相脱落）。
2. 已开封未用完 SPE 柱的储存
   • 若单次实验未用完一根 SPE 柱（如部分样品量较少的情况），需用合适的溶剂（如正己烷、甲醇）冲洗柱床后密封，防止填料干涸。例如反相柱可用甲醇 - 水（9:1）保存，正相柱可用正己烷保存。
   • 标记开封日期和剩余容量，优先使用近期开封的柱子，避免长期存放导致性能下降。

二、使用过程中的操作规范

1. 活化与平衡阶段
   • 严格按照方法要求选择活化溶剂，确保填料充分溶胀。例如反相 C18 柱需用甲醇活化（去除残留杂质并湿润填料），再用样品溶剂（如水或缓冲液）平衡，避免直接上样导致填料疏水塌陷。
   • 活化时控制流速（通常 1-5mL/min），避免溶剂快速流过导致柱床未充分浸润，可通过重力滴加或固相萃取装置的压力调节实现。
2. 上样与淋洗操作
   • 上样体积不超过 SPE 柱的最大吸附容量，避免样品过载导致目标物穿透。若样品体积较大，可分多次上样，每次确保前一次样品进入柱床后再添加。
   • 淋洗溶剂的选择需匹配填料类型，避免目标物被误淋洗。例如离子交换柱淋洗时，需控制溶液 pH 值，防止目标离子提前洗脱。同时，淋洗流速不宜过快，确保杂质充分被冲洗。
3. 洗脱阶段
   • 洗脱溶剂应足量且能有效溶解目标物，通常分多次洗脱（如 2-3 次），每次洗脱液流过柱床后再添加下一次，提高回收率。例如用 5mL 洗脱溶剂可分 2 次（3mL+2mL）进行，减少溶剂用量的同时保证洗脱效率。
   • 避免洗脱时用力挤压柱体或使用过高压力，防止柱床压实、填料颗粒破碎，导致流速异常或样品污染。

三、清洁与维护

1. 柱体外部清洁
   • 使用后及时擦拭柱管外壁，去除残留的样品或溶剂（尤其是腐蚀性溶液，如酸、碱），防止柱管老化或标签脱落。
   • 固相萃取装置（如 manifold）与 SPE 柱连接的接口需定期清洁，用纯水或有机溶剂冲洗，避免交叉污染。
2. 柱床维护
   • 若发现柱床出现气泡或干裂，需立即停止使用，此类情况多因活化不充分或溶剂干涸导致，继续使用会导致流速不均、目标物吸附 / 洗脱效率下降。
   • 避免样品中含有颗粒物，上样前需经 0.45μm 或 0.22μm 滤膜过滤，防止颗粒堵塞柱床，导致流速骤降。若柱床已堵塞，可反向用溶剂缓慢冲洗（仅限可反冲的 SPE 柱），无效则需更换。

四、性能监控与更换标准

1. 日常性能检查
   • 每次使用前观察 SPE 柱外观，若发现柱管破裂、填料泄漏或柱床塌陷，直接弃用。
   • 通过空白实验监控柱内污染：用活化 - 洗脱流程处理空白溶剂，检测洗脱液中是否有干扰峰，若存在杂质峰且超过方法允许范围，说明柱子受污染，需更换。
2. 回收率与重复性监控
   • 定期用标准品进行回收率验证，若同批次 SPE 柱的回收率波动超过 10%（或方法规定范围），可能是柱子性能下降，需排查原因（如活化不充分、填料失效），必要时更换新柱。
   • 记录每根 SPE 柱的使用次数，多数 SPE 柱为一次性使用，但部分高容量柱可重复使用（需验证重复性），重复使用前需用强溶剂清洗（如甲醇 - 乙酸乙酯混合液），避免交叉污染。

五、其他注意事项

• 不同品牌、型号的 SPE 柱结构存在差异，需严格遵循厂家提供的操作指南，避免混用不同类型柱子的维护方法（如聚合物基质柱与硅胶基质柱的活化溶剂不同）。
• 实验结束后及时清理废弃 SPE 柱，分类处理（如含有机溶剂的柱子需按危险废物处理），避免环境污染。