掌握超滤离心管正确使用方法是保障实验成功的关键
点击次数：16 更新时间：2025-12-01
超滤离心管是一种集离心与膜分离技术于一体的实验室耗材，广泛应用于蛋白质浓缩、脱盐、缓冲液置换、核酸纯化及小分子去除等生物化学操作。其核心为内置特定截留分子量的超滤膜，通过离心力驱动样品透过膜孔，实现目标分子的高效分离。然而，若操作不当，易导致膜堵塞、样品损失、回收率低甚至管体破裂。掌握其正确使用方法，是保障实验成功的关键。
一、使用前准备
按分子量精准选膜：目标大分子应大于MWCO的2–3倍，小分子杂质小于1/2MWCO，确保有效截留与透过；
润湿膜面（必要时）：对疏水性膜（如PVDF），先加入少量缓冲液或乙醇润湿5分钟，再离心去除，避免气阻影响流速；
检查管体完整性：确认滤膜无破损、管盖密封圈完好，避免离心泄漏。
二、样品加载规范
控制上样体积：通常不超过离心管最大容量的75%（如15mL管加样≤11mL），预留浓缩空间；
预澄清处理：含颗粒或细胞碎片的样品需先低速离心（如3,000×g，5min）或过滤，防止膜孔堵塞；
避免高粘度或高浓度直接上样：可适当稀释，提升初始通量。
三、离心参数设置
参照厂家推荐转速：通常3,000–5,000×g，严禁超速（查看管壁标注的最大RCF值）；
设定合适时间：分阶段离心（如每次10–15分钟），观察浓缩液体积，避免干膜；
低温操作：对热敏蛋白，使用4℃冷冻离心机，防止变性。
四、浓缩与洗涤操作技巧
缓冲液置换：当浓缩至约100–200μL时，加入等体积新缓冲液，混匀后再离心，重复2–3次可去除＞95%小分子杂质；
避免膜干涸：浓缩终点保留至少50μL液体，干膜将不可逆降低回收率；
轻柔混匀：用移液器缓慢吹打，勿剧烈震荡损伤大分子。
五、回收与清洁（若为可重复使用型）
多数超滤离心管为一次性设计，但部分型号可重复使用；
使用后立即用去离子水冲洗，再用0.1MNaOH或专用清洗液浸泡，去除残留；
严禁高压灭菌或烘干，以免膜结构变形。
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