科学识别超滤离心管出现的问题并采取针对性措施是实现长期稳定的关键
点击次数:31 更新时间:2026-01-07
超滤离心管是一种集离心与分子筛分功能于一体的实验室耗材,广泛应用于蛋白质浓缩、脱盐、缓冲液置换及核酸纯化等生物化学操作。其核心为内置截留分子量的超滤膜,通过离心力驱动小分子透过膜而大分子被截留。尽管操作简便,但在实际使用中可能会因选型错误、操作不当或保存不善导致回收率低、堵塞、破裂或交叉污染等问题,严重影响实验结果。科学识别超滤离心管出现的问题并采取针对性措施,是实现长期稳定过滤的关键。

一、浓缩效率低或无法浓缩
原因:膜孔径(MWCO)选择过大、样品黏度过高、离心参数不足。
解决方法:
确保目标分子量≥2–3倍MWCO(如50kDa蛋白应选10K或30K管);
高黏度样品(如细胞裂解液)先低速预离心去除碎片,或稀释后处理;
按说明书设置离心力(通常1,000–14,000×g)和时间,避免过低转速导致通量不足。
二、滤膜堵塞或流速骤降
原因:样品含颗粒杂质、脂质或高浓度蛋白聚集。
解决方法:
上样前用0.45μm或0.22μm滤器预过滤;
对含脂样品,加入适量去垢剂(如0.1%Tween-20)减少膜吸附;
采用“间歇离心法”:离心5分钟→暂停1–2分钟→再离心,缓解浓差极化。
三、目标物回收率低
原因:非特异性吸附、膜结合、残留体积过大。
解决方法:
选用低吸附型超滤管(如带亲水涂层的RC膜);
浓缩后用少量原缓冲液反向洗涤滤膜上表面,提高洗脱率;
选择“死体积”小的型号(部分产品可低至<5μL),减少样品滞留。
四、离心管破裂或漏液
原因:超速离心、管体老化、未配平。
解决方法:
严格遵守离心力限制(标注于管壁),切勿超限使用;
检查管体是否有划痕、白化或脆化,一次性耗材禁止重复高压灭菌;
离心前务必对称配平(质量差≤0.1g),使用适配套管。